Techniques d'immunodosage

Le principe de fonctionnement de cette technique est le suivant : les sites de liaison d'un anticorps se fixent de manière spécifique et non covalente à un polluant cible leur correspondant (également appelé antigène).

Dans un premier temps, il y a une extraction par un solvant adapté, du polluant recherché dans une matrice sol ou eau.

Dans un second temps, l’échantillon contenant le polluant à doser et un réactif contenant une enzyme conjuguée sont mélangés avec des anticorps. L’enzyme conjuguée et le polluant se lient compétitivement aux anticorps. Les échantillons contenant le plus de polluant occuperont plus de sites de réception des anticorps que les enzymes conjuguées. Après incubation, les polluants de l’échantillon et les enzymes conjuguées non liées sont ôtés du récipient et des indicateurs colorés sont ajoutés. La teneur en polluant dans l’échantillon est déterminée, soit en comparant visuellement l’intensité du développement de couleur avec ceux de standards, soit par un spectrophotomètre.

Types de kits :

Il existe plusieurs types de techniques d’immunodosage dont voici quelques exemples : 

• Tests ELISA (acronyme d’Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay) pour les HAP et les PCB,
• Kit Elisa-Viditest PAH permet de détecter facilement et rapidement les HAP dans les échantillons environnementaux (eau, sols, sédiments…) à un seuil de 10 μg/litre, 
• PCB RaPID Assays® permet une analyse semi-quantitative entre 0,5 et 10 mg/kg,
• PCB Immunoassay kit permet une analyse semi-quantitative entre 1 et 10 mg/kg,
• EnSys Petro Test System pour HCT de 10 à 1000 mg/kg).

Les techniques d'immunodosage utilisent des anticorps pour identifier et quantifier les polluants organiques et un nombre limité de polluants inorganiques. Des anticorps ont été produits pour se lier à un composé cible ou à une classe de composés. 

Les kits d'immunodosage sont relativement rapides et simples à utiliser. La technologie est largement utilisée pour l'analyse environnementale sur le terrain.

Il est impératif d'avoir une certaine connaissance des contaminants préoccupants sur un site avant de sélectionner un kit de test immunologique.

Légende des tableaux 1, 2 et 3 suivants : 

✅ = Technique applicable
❌ = Technique inapplicable

Milieu :

Le tableau 1 ci-dessous indique les milieux pour lesquels la technique d'immunodosage est applicable ou non :

Type de sol :

Le tableau 2 ci-dessous indique les types de sols pour lesquels la  technique d'immunodosage est applicable ou non :

Hydrogéologie :

Le tableau 3 ci-dessous indique les conditions hydrogéologiques dans lesquelles la technique d'immunodosage est applicable ou non :

Le tableau 4 ci-dessous indique les polluants caractérisables ou non au moyen de la technique d'immunodosage.

Légende du tableau 4 : 

✅ = Polluant caractérisable
❌ = Polluant incaractérisable

Les limites de détection du kit de test varient en fonction des polluants cibles, de la matrice d'échantillon et des interférences.
Les kits disponibles ont des limites de détection de ppm, ppb et même des parties par trillion (ppt) pour l'eau. Les limites de détection sont plus élevées pour les sols car une extraction est nécessaire. 

Le tableau 5 ci-dessous indique les étapes aux cours desquelles la technique d'immunodosage est utilisable ou non :

Légende du tableau : 
✅= Technique utilisable
❌ = Technique inutilisable

Semi-quantitatif 

Quantitatif 

Avantages :

Les Techniques d'immunodosage présentent les avantages suivants 

• Coût modéré
• Rapidité de la mesure,
• Bonne sensibilité, simplicité d’utilisation même par un débutant,
• Portabilité des kits,
• Possibilité d’analyse de 30 à 60 échantillons par jour

Inconvénients :

Les inconvénients et les facteurs limitants de ces techniques sont les suivants :

• Présence d’interférence,
• Sensibilité à la température,
• Précision moyenne.

Location : Coûts d’analyse sauf  main d’œuvre : 10 $ à 30 $ par échantillon d'eau et de 20 $ à 40 $ par échantillon de sol (USEPA, novembre 2007).

Techniques éprouvée : malgré une R&D aboutie, la technique est plus ou moins utilisée sur le terrain.

Pour raisons de sécurité, certains EPIs sont obligatoires sur le terrain : casquette, tee-shirt ou pull manches longues, gants jetable néoprène, chaussures de sécurité, blouses, lunettes.

Bibliographie :

US EPA - Clu-in (2025) Immunoassay and Enzymatic Assays
https://clu-in.org/characterization/technologies/immunoassay.cfm

Coussy S., Dubrac, N. avec la participation de Rouvreau L. – (2020) – Guide de caractérisation des terres excavés dans le cadre de leur valorisation hors site dans des projets d’aménagement et en technique routière pour des projets d’infrastructures linéaire de transport – Cas des terres excavées issues de sites et sols potentiellement pollués. Rapport final. BRGM/RP-69581-FR, 41 p., 7 fig., 6 tab., 1 ann.

Laperche V., Hube D., Guérin V. & Aubert N., (2014). Outils de mesure sur site : quel besoin et quelles mesures pour quelle utilisation ? Rapport final. ADEME. 22p

Favéreaux S., Drzewiecki P. Lion F., Coftier A., Marot F., Perronnet K. avec la collaboration de : Dubrac N., Guérin V., Roussel H., Duclos Y., Grand C., Bégassat P., Masselot G., Jacquemin P., Lethielleux L., Hulot C., Quiot F., Quéron J. & Lepot B. – (2023) - Guide Diagnostic des sites et sols pollués, 260p.